2 × PCR Master Mix (sense colorant)
PCR Master Mix és una mena de solució premesclada de PCR convencional que està llesta per utilitzar, inclosa Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 i tampó optimitzat.Durant la reacció, només es pot afegir el cebador i la plantilla per a l'amplificació, la qual cosa simplifica molt els passos de funcionament de l'experiment.Aquest producte conté excel·lents estabilitzadors i es pot emmagatzemar durant 3 mesos a 4 ℃.El producte de PCR té una protrusió de 3′-dA i es pot clonar fàcilment en un vector T.
Condicions d'emmagatzematge
El producte s'ha d'emmagatzemar a -25 ℃ ~ -15 ℃ durant dos anys.
Especificacions
| Fidelitat (contra Taq) | 1× |
| Inici en calent | No |
| voladís | 3′-A |
| Polimerasa | Taq DNA polimerasa |
| Format de reacció | SuperMix o Master Mix |
| Velocitat de reacció | Estàndard |
| Tipus de Producte | Mescla mestra de PCR (2 ×) |
Instruccions
1.Sistema de reacció
| Components | Mida (μL) |
| Plantilla d'ADN | Adequat |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mescla mestra de PCR | 25 |
| ddH2O | Fins als 50 |
2.Protocol d'amplificació
| Passos del cicle | Temperatura (°C) | Temps | Cicles |
| Pre-desnaturalització | 94 ℃ | 5 minuts | 1 |
| Desnaturalització | 94 ℃ | 30 segons | 35 |
| Recuit | 50-60 ℃ | 30 segons | |
| Extensió | 72 ℃ | 30-60 segons/kb | |
| Pròrroga final | 72 ℃ | 10 minuts | 1 |
Notes:
1) Ús de plantilla: 50-200 ng d'ADN genòmic;0,1-10 ng d'ADN plasmidi.
2) Mg2+concentració: aquest producte conté 3 mM de MgCl2 adequat per a la majoria de reaccions de PCR.
3) Temperatura de recuit: consulteu el valor de Tm teòric dels primers.La temperatura de recuit es pot configurar entre 2 i 5 ℃ per sota del valor teòric de l'imprimació.
4) Temps d'extensió: per a la identificació molecular, es recomana 30 segons/kb.Per a la clonació de gens, 60es recomana sec/kb.
Notes
1.Per a la vostra seguretat i salut, feu servir bates de laboratori i guants d'un sol ús per operar.
2.Només per a ús d'investigació!
