prou
Productes
Warm Start Bst 2.0 DNA polimerasa (sense glicerol) HC5006A Imatge destacada
  • Warm Start Bst 2.0 DNA polimerasa (sense glicerol) HC5006A

Warm Start Bst 2.0 DNA polimerasa (sense glicerol)


 Cat No: HC5006A

Paquet: 1600U/8000U/80000U (8U/μL)

La Bst DNA polimerasa V2 deriva de l'ADN polimerasa I de Bacillus stearothermophilus

Descripció del producte

Detall del producte

La Bst ADN polimerasa V2 deriva de l'ADN polimerasa I de Bacillus stearothermophilus, que té una activitat d'ADN polimerasa 5'→3' i una forta activitat de substitució de la cadena, però sense activitat exonucleasa 5'→3'.Bst DNA Polymerase V2 és ideal per al desplaçament de cadena, amplificació isotèrmica LAMP (amplificació isotèrmica mediada per bucle) i seqüenciació ràpida.Bst DNA polimerasa V2 és una versió d'arrencada en calent basada en Bst DNA polimerasa V2 (HC5005A) obtinguda mitjançant tecnologia de modificació reversible, que pot inhibir l'activitat de l'ADN polimerasa a temperatura ambient, de manera que el sistema de reacció es pot operar i formular a temperatura ambient per evitar que no -amplificació específica i millora l'eficiència de la reacció, i aquesta versió es pot liofilitzar.A més, la seva activitat s'allibera a altes temperatures, de manera que no cal un pas d'activació independent.


  • Anterior:
  • Pròxim:

  • Components

    Component

    HC5006A-01

    HC5006A-02

    HC5006A-03

    Bst DNA polimerasa V2 (sense glicerol) (8U/μL)

    0,2 ml

    1 ml

    10 ml

    Buffer 10×HC Bst V2

    1,5 ml

    2 × 1,5 ml

    3 × 10 ml

    MgSO4(100 mm)

    1,5 ml

    2 × 1,5 ml

    2 × 10 ml

     

    Aplicacions

    1.Amplificació isotèrmica LAMP

    2.Reacció de desplaçament d'una cadena d'ADN

    3.Seqüenciació de gens GC alt

    4.Seqüenciació d'ADN a nivell de nanogrames.

     

    Condició d'emmagatzematge

    Transport a menys de 0 °C i emmagatzemat a -25 °C ~ -15 °C.

     

    Definició de la unitat

    Una unitat es defineix com la quantitat d'enzim que incorpora 25 nmol de dNTP al material insoluble en àcid en 30 minuts a 65 °C.

     

    Control de qualitat

    1.Assaig de puresa de proteïnes (SDS-PAGE):La puresa de l'ADN polimerasa Bst V2 es determina ≥99% mitjançant l'anàlisi SDS-PAGE mitjançant la detecció de Coomassie Blue.

    2.EndonucleasaActivitat:La incubació d'una reacció de 50 μL que conté un mínim de 8 U d'ADN polimerasa Bst V2 amb 1 μg d'ADN λ durant 16 hores a 37 ℃ no produeix una degradació detectable tal com es determina.

    3.Activitat exonucleasa:La incubació d'una reacció de 50 μL que conté un mínim de 8 U d'ADN polimerasa Bst V2 amb 1 μg d'ADN digerit λ -Hind Ⅲ durant 16 hores a 37 ℃ no produeix una degradació detectable tal com es determina.

    4.Activitat Nickase:La incubació d'una reacció de 50 μL que conté un mínim de 8 U d'ADN polimerasa Bst V2 amb 1 μg d'ADN pBR322 durant 16 hores a 37 °C no produeix una degradació detectable tal com s'ha determinat.

    5.Activitat RNasa:La incubació d'una reacció de 50 μL que conté un mínim de 8 U d'ADN polimerasa Bst V2 amb 1,6 μg d'ARN MS2 durant 16 hores a 37 °C no produeix una degradació detectable tal com s'ha determinat.

    6.E. coliADN:120 U d'ADN polimerasa Bst V2 s'examinen per detectar la presència d'ADN genòmic d'E. coli mitjançant qPCR TaqMan amb cebadors específics per al locus rRNA 16S d'E. coli.La contaminació de l'ADN genòmic d'E. coli és ≤1 còpia.

     

    Reacció LAMP

    Components

    25μL

    Buffer 10×HC Bst V2

    2,5 μl

    MgSO4 (100 mm)

    1,5 μl

    dNTP (10 mM cadascun)

    3,5 μl

    SYTO™ 16 Verd (25×)a

    1,0 μl

    Primer mesclab

    6 μl

    Bst DNA polimerasa V2 (sense glicerol) (8 U/uL)

    1 μl

    Plantilla

    × μL

    ddH₂O

    Fins a 25 μL

    Notes:

    1) a.SYTOTM 16 Verd (25×): Segons les necessitats experimentals, es poden utilitzar altres colorants com a substituts;

    2) b.Mescla d'imprimació: s'obté barrejant 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2,5 µ M F3, 2,5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB i altres volums.

     

    Reacció i condició

    1 × HC Bst V2 Buffer, la temperatura d'incubació està entre 60 °C i 65 °C.

     

    Inactivació per calor

     80 °C, 20 minuts

    Escriu el teu missatge aquí i envia'ns-ho