DNasa I (lliure de rnasa) (2u/ul)
Cat No: HC4007B
La DNasa I és una endonucleasa que pot digerir ADN de cadena simple o doble.Pot hidrolitzar enllaços fosfodièster per produir mono i oligodesoxinucleòtids que contenen un grup 5'-fosfat i un grup 3'-OH.El rang de pH òptim de treball de la DNasa I és de 7-8.L'activitat de la DNasa I depèn del Ca2+i pot ser activat per ions metàl·lics divalents com el CO2, Mn2+, Zn2+, etc. En presència de Mg2+, La DNasa I pot escindir aleatòriament qualsevol lloc d'ADN de doble cadena;Mentre en presència de Mn2+, La DNasa I pot escindir l'ADN de doble cadena al mateix lloc, formant extrems roms o extrems enganxosos amb 1-2 nucleòtids que sobresurten.Es pot utilitzar per al processament de diverses mostres d'ARN.
Components
Nom | 1KU | 5KU |
DNasa I recombinant (lliure de RNasa) | 500 μl | 5 × 500 μL |
Tampó de reacció DNasa I (10 ×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Condicions d'emmagatzematge
Aquest producte s'ha d'emmagatzemar a -25 ~ -15 ℃ durant 2 anys.Si us plau, eviteu la congelació-descongelació repetida.
Instruccions
S'aplica a l'eliminació d'ADN de mostres d'ARN només com a referència.
1. Utilitzeu tubs de centrífuga sense RNasa i puntes de pipeta per preparar el següent sistema de reacció:
Components | Volum (μl) |
Tampó de reacció DNasa I (10 ×) | 1 |
ADNasel recombinant (lliure de RNasa) | 1 |
ARN | X |
ddH lliure de RNasa2O | Fins a 10 |
2. Les condicions de reacció són les següents: 37 ℃, després de 15-30 minuts, afegiu una concentració final de solució d'EDTA 2,5 mM i barregeu bé, després 65 ℃ durant 10 minuts.La plantilla processada es pot utilitzar per a experiments posteriors de RT-PCR o RT-qPCR, etc.
Notes
1. La DNasa l és sensible a la desnaturalització física;En barrejar, invertir suaument el tub d'assaig iagitar bé, no agitar amb força.
2. L'enzim s'ha d'emmagatzemar en una caixa de gel o en un bany de gel quan s'utilitza, i s'ha d'emmagatzemar a -20 ℃ immediatament després de l'ús.
3. Aquest producte només és per a ús d'investigació.
4. Si us plau, opereu amb bates de laboratori i guants d'un sol ús, per a la vostra seguretat.