2 × Rapid Taq Super Mix
Cat No: HCR2016A
2×Rapid Taq Super Mix es basa en l'ADN polimerasa Taq modificada, que afegeix un fort factor d'extensió, un factor de millora de l'amplificació i un sistema tampó optimitzat, amb una eficiència d'amplificació molt alta.La velocitat d'amplificació de plantilles complexes com el genoma dins de 3 kb arriba a 1-3 seg/kb, i la de plantilles simples com els plasmidis dins de 5 kb arriba a 1 seg/kb.Aquest producte pot estalviar molt el temps de reacció de PCR.Al mateix temps, la barreja conté dNTP i Mg2+, que només es poden amplificar afegint primers i plantilles, cosa que també simplifica molt els passos de funcionament de l'experiment.A més, la barreja conté colorant indicador electroforètic, que pot ser directament electroforesi després de la reacció.L'agent protector d'aquest producte fa que la barreja mantingui l'activitat estable després de repetides congelacions i descongelacions.La banda A de l'extrem 3' del producte de PCR es pot clonar fàcilment al vector T.
Components
2 × Rapid Taq Super Mix
Condicions d'emmagatzematge
Els productes PCR Master Mix s'han d'emmagatzemar a -25 ~ -15 ℃ durant 2 anys.
Especificacions
| Especificació del producte | Rapid Taq Super Mix |
| Concentració | 2× |
| Inici en calent | Inici en calent integrat |
| voladís | 3′-A |
| Velocitat de reacció | Ràpid |
| Mida (producte final) | Fins a 15 kb |
| Condicions per al transport | Gel sec |
Instruccions
1. Sistema de reacció (50 μL)
| Components | Mida (μL) |
| Plantilla d'ADN* | adequat |
| Cebador directe (10 μmol/L) | 2.5 |
| Cebador invers (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2 × Rapid Taq Super Mix | 25 |
| ddH2O | a 50 |
2.Protocol d'amplificació
| Passos del cicle | Temperatura (°C) | Temps | Cicles |
| Predesnaturalització | 94 | 3 min | 1 |
| Desnaturalització | 94 | 10 segons |
28-35 |
| Recuit | 60 | 20 segons | |
| Extensió | 72 | 1-10 segons/kb |
Ús recomanat de diferents plantilles:
| Tipus de plantilla | Interval d'ús del segment (sistema de reacció de 50 μL) |
| ADN genòmic o líquid E. coli | 10-1.000 ng |
| ADN plasmidi o viral | 0,5-50 ng |
| cDNA | 1-5 µL (no més d'1/10 del volum total de la reacció de PCR) |
| Ús recomanat de diferents plantilles | |
Notes:
1.Ús de reactius: descongelar i barrejar completament abans de l'ús.
2. Temperatura de recuit: la temperatura de recuit és el valor Tm universal, i també es pot configurar 1-2 ℃ per sota del valor Tm de l'imprimació.
3. Velocitat d'extensió: estableix 1 seg/kb per a plantilles complexes com el genoma i E. coli dins d'1 kb;establir 3 seg/kb per a plantilles complexes com el genoma d'1-3 kb i E. coli;establiu 10 segons/kb per a plantilles complexes de més de 3 kb de genoma i E. coli.Podeu establir el valor a 1 s/kb per a una plantilla simple, com ara un plasmidi de menys de 5 kb, 5 s/kb per a una plantilla simple, com ara un plasmidi entre 5 i 10 kb, i 10 s/kb per a una plantilla simple com un plasmidi de més de 10 kb.
Notes
1. Per la vostra seguretat i salut, feu servir bates de laboratori i guants d'un sol ús per operar.
2. Aquest producte només és per a ús d'investigació!
