2 × PCR Super Mix (amb colorant)
2 × PCR Master Mix conté Taq DNA polimerasa, dNTPs i altres components requerits per PCR.El Master Mix és estable durant 3 mesos a 4 ℃ amb els nostres estabilitzadors personalitzats.La solució de premescla està optimitzada per a la PCR convencional i està llesta per utilitzar afegint una plantilla d'ADN i cebadors.Els productes de PCR es poden carregar directament per a l'electroforesi amb colorant blau de bromofenol precarregat.Els productes amplificats contenen una protuberància de 3 '-dA i es poden clonar fàcilment al vector T.El 2×PCR Master Mix simplifica el procediment de PCR i redueix la contaminació.
Condicions d'emmagatzematge
Els productes s'han d'emmagatzemar a -25 ℃ ~ -15 ℃ durant 2 anys.
Especificacions
| Fidelitat (vs. Taq) | 1× |
| Inici en calent | No |
| voladís | 3'-A |
| Polimerasa | Taq DNA polimerasa |
| Format de reacció | SuperMix o Master Mix |
| Velocitat de reacció | Estàndard |
| Tipus de Producte | Mescla mestra de PCR (2x) |
Instruccions
1.Sistema de reacció
| Components | Volum(μl) |
| Plantilla d'ADN | Adequat |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2 × PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | a 50 |
2.Protocol d'amplificació
| Passos del cicle | Temperatura (°C) | Temps | Cicles |
| Desnaturalització inicial | 94 | 5 min | 1 |
| Desnaturalització | 94 | 30 segons | 35 |
| Recuit | 50-60 | 30 segons | |
| Extensió | 72 | 30-60 segons/kb | |
| Pròrroga final | 72 | 10 min | 1 |
Nota:
1) Ús de plantilla: 50-200 ng d'ADN genòmic;0,1-10 ng d'ADN plasmidi.
2) Mg2+concentració: aquest producte conté 3 mM de MgCl2, adequat per a la majoria de reaccions de PCR.
3) Temperatura de recuit: Consulteu el valor de Tm teòric dels imprimadors.La temperatura de recuit es pot establir entre 2 i 5 ℃ per sota del valor teòric de la imprimació.
4) Temps d'extensió: per a la identificació molecular, es recomana 30 segons/kb.Per a la clonació de gens, es recomana 60 segons/kb.
Notes
1.Els productes de PCR amb 2 × PCR Master Mix no són adequats per a l'electroforesi en gel de poliacrilamida.
2.Per a la vostra seguretat i salut, feu servir bates de laboratori i guants d'un sol ús per operar.
3.S'utilitza NOMÉS per a la investigació!
