Fosfatasa alcalina (ALP)

La fosfatasa alcalina es deriva d'una soca d'E. coli recombinant que porta el gen TAB5.L'enzim catalitza la desfosforilació dels extrems 5' i 3' dels fosfomonoèsters d'ADN i ARN.A més, hidrolitza la ribosa, així com els desoxiribonucleòsids trifosfats (NTPs i dNTPs).La fosfatasa alcalina TAB5 actua sobre els extrems de 5' sobresortint, 5' encastats i roms.La fosfatasa es pot utilitzar en moltes aplicacions de biologia molecular, com ara la clonació o l'etiquetatge dels extrems de la sonda per eliminar els extrems fosforilats de l'ADN o l'ARN.En els experiments de clonació, la desfosforilació impedeix que l'ADN plasmidi linealitzat s'autolligui.També pot degradar dNTP no incorporats en reaccions de PCR per preparar una plantilla per a la seqüenciació d'ADN.L'enzim s'inactiva de manera completa i irreversible escalfant-se a 70 °C durant 5 minuts, fent que no sigui necessària l'eliminació de la fosfatasa abans de la lligadura o l'etiquetatge final.